
VIDAS의 종합적인 기술 평가, API 20E, 그리고 SN 0170-92 단일 CNCA 숙련도 테스트 블라인드 샘플에 적용된 탐지 경로 치킨밀. 서류 벤치마크 정확도, 시간 소모, 절차적 복잡성, 세 가지 방법에 따른 운영 비용, 구조화된 생화학 데이터와 표준화된 실험실 작업 흐름의 지원.
이 연구에서는 VIDAS라는 세 가지 탐지 방법을 사용합니다., API 20E, 그리고 SN 0170-92 — 닭고기 가루의 일반적인 병원성 박테리아에 대한 CNCA 숙련도 테스트 프로그램에서 제공되는 블라인드 샘플을 검사합니다.. 각 탐지 방법의 강점과 약점 살 모 넬 라 요약하고 비교한다. 살 모 넬 라 주로 동물의 소화관을 통해 전염되며 장티푸스 및 파라티푸스를 유발할 수 있습니다. (통칭 장열이라고 함), 식중독, 패혈증, 그리고 만성장염. 왜냐하면 살 모 넬 라 자연계에 널리 퍼져 있으며 인간의 건강에 심각한 위협을 가하고 있습니다., 전 세계 국가의 위생 규정은 일반적으로 다음과 같이 규정하고 있습니다. 살 모 넬 라 닭고기 가루에서 검출되어서는 안 됩니다..
현재, 일반적으로 사용되는 검출 방법에는 국가 표준 방법과 같은 기존의 생화학 테스트 방법이 포함됩니다. (기가바이트) 및 수출입 상품 검사 산업 표준 (SN); 비다스 방식, 효소결합면역형광기술을 활용한; PCR과 같은 분자 생물학 방법. 각 방법에는 고유한 장점과 단점이 있습니다.. 에서 2006, 본 연구실에서는 CNCA 숙련도 테스트 "닭고기에 함유된 일반적인 병원성 박테리아"에 참여했습니다. (CNCA-06-02)” 그리고 하나를 발견했습니다 살 모 넬 라 세 가지 다른 방법을 사용하여 격리: 라이브, SN 0170-92, 및 API 20E. 완전하게 작동하는 현재 보고서 문서.
기술 서류는 서술형 기사가 아닌 구조화된 데이터 참조로 구성됩니다.. 기기 구성을 제시하기 위해 고밀도의 표준 테이블을 사용합니다., 시약 소스, 절차적 단계, 생화학 반응 프로필, 시간 소모 분석, 정확성 평가, 및 방법 선택 안내. 이 형식은 신속한 색인 생성을 지원하도록 설계되었습니다., 추천 조각 추출, 직접 실험실 벤치 사용.
비교탐지 프로그램에서 추출된 통합 헤드라인 매개변수.
세 가지 감지 경로는 각각 고유한 기기 및 시약 생태계에 의존합니다.. 아래 표에는 모든 중요 소모품에 대한 제조업체 및 공급업체가 나와 있습니다., 방법이 모호함 없이 재현될 수 있도록.
| 방법 | 기구 / 소프트웨어 | 시약 및 미디어 | 제조업체 / 공급자 |
|---|---|---|---|
| 라이브 | mini-VIDAS 자동 면역분석 분석기 | VIDAS SLM 시약 키트; 엠육수 | bioMérieux, 프랑스 |
| API 20E | API LAB 소프트웨어 제품군; API 20E 시약 스트립 | API 20E 생화학 스트립; 보조 시약 | bioMérieux, 프랑스 |
| SN 0170-92 | 기존 미생물 실험실 장비 | 문화미디어, 생화학 시약, 항혈청 | 베이징 랜드 브리지 기술 유한 회사, (주). |
| 일반 미디어 | 인큐베이터, 수욕, 잔액 | 완충된 펩톤수 (BP); 테트라티오네이트 브릴리언트 그린 브로스 (TTB) | 베이징 랜드 브리지 기술 유한 회사, (주). |
| 격리 매체 | 루프 접종, 접시 | 비스무스 아황산염 한천; 디옥시콜레이트 구연산염 유당 한천 (DCLS) | 베이징 랜드 브리지 기술 유한 회사, (주). |
| 혈청학 | 슬라이드 응집 | "O" 인자 항혈청 | 베이징 랜드 브리지 기술 유한 회사, (주). |
SN 방법은 SN을 따릅니다. 0170-92. VIDAS 및 API 20E 절차는 제조업체가 규정한 작업 프로토콜에 따라 실행되었습니다.. 아래 표는 각 방법을 해당 관리 문서에 연결하고 허용되는 절차적 자유 수준을 지정합니다..
| 방법 | 관리 문서 | 절차 관리 | 표준상태 |
|---|---|---|---|
| SN 0170-92 | SN 0170-92, 수출 닭고기 식사 살 모 넬 라 검사 방법 | 표준에 의해 전체 규정됨 | 업계 참고 방법 |
| 라이브 | 제조업체의 검증된 절차 | 계측기 중심, 소프트웨어로 제어되는 | FDA가 인정한 신속 스크리닝 방법 |
| API 20E | 제조업체의 검증된 절차 | 수동 스트립 접종, 소프트웨어 판독 | 소형화된 기존 생화학적 방법 |
| 용량 테스트 | CNCA-06-02 숙련도 테스트 계획 | CNCA에서 배포한 블라인드 샘플 | 연구실간 비교 |
SN 0170-92 절차는 세 가지 경로 중 가장 포괄적입니다.. 사전 농축에서 선택적 농축을 거쳐 진행됩니다., 차동 매체에 대한 격리, 선별검사, 생화학적 확인, 및 혈청학적 타이핑. 각 단계는 시간에 따라 분리되어 있으며 고유한 미디어 및 시약 세트가 필요합니다..
| 단계 | 작업 | 미디어 / 시약 | 정황 | 지속 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 사전 농축 | 완충된 펩톤수 (BP) | 37 ° C | 24 H |
| 2 | 선택적 농축 | 테트라티오네이트 브릴리언트 그린 브로스 (TTB) | 42 ° C | 6-8시간 |
| 3 | 격리 | 비스무스 아황산염 한천; DCLS 한천 | 37 ° C | 24 ± 2 H |
| 4 | 선별검사 | 삼중 설탕철 (TSI) 한천 | 37 ° C | 24 H |
| 5 | 생화학적 확인 | 라이신 탈탄산효소, Urease, V-P, 산업단지, 인돌, 말로네이트하다, 둘시톨 | 37 ° C | 24-48시간 |
| 6 | 혈청학적 확인 | "O" 인자 항혈청 | 실온에서 슬라이드 응집 | 분 |
VIDAS 경로는 탐지 체인을 네 가지 주요 단계로 압축합니다.: 사전 농축, 선택적 농축, M 국물에서 농축 후, 자동화된 면역분석법. 격리판이나 수동 생화학 스트립이 필요하지 않습니다., 유통기한이 짧은 가장 큰 이유다.. 는 1 M 국물의 mL 부분을 에서 열처리합니다. 100 °C 15 분, 그리고 0.5 처리된 배양액의 mL를 기기 판독을 위해 시약 스트립에 로드합니다..
| 단계 | 작업 | 중간 / 치료 | 정황 | 지속 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 사전 농축 | 25 g 샘플 입력 225 mL 완충 펩톤수 | 37 ° C | 24 H |
| 2 | 선택적 농축 | 10 밀리리터로 100 밀리리터 TTB | 42 ° C | 6-8시간 |
| 3 | 농축 후 | 1 밀리리터로 10 mL M 국물 | 42 ° C | 18 H |
| 4 | 샘플 처리 | 1 mL M 국물을 수조에서 가열 | 100 ° C, 15 분 | 15 분 |
| 5 | 기기 분석 | 0.5 mL를 VIDAS SLM 시약 스트립에 넣습니다. | 자동화된 미니라이프 | 1시간 |
| 6 | 결과 출력 | 기기에서 인쇄된 보고서 | 자동통역 | 즉각적인 |
API 20E 경로는 기존의 농축 및 분리 순서를 유지하지만 개별 생화학 튜브를 단일 20웰 시약 스트립으로 대체합니다.. 분리판에서 의심스러운 집락을 골라냅니다., 정지된, 그리고 마이크로 튜브에 접종합니다.. 인큐베이션 및 보조 시약 첨가 후, 긍정적/부정적 패턴은 수치 프로필로 변환되어 식별을 위해 API LAB 소프트웨어에 제출됩니다..
| 단계 | 작업 | 중간 / 시약 | 정황 | 지속 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 사전 농축 및 선택적 농축 | BP에 이어 TTB | 37 °C 다음 42 ° C | 24 H + 6-8시간 |
| 2 | 격리 문화 | Bismuth sulfite 한천 및 DCLS 한천 | 37 ° C | 24 ± 2 H |
| 3 | 콜로니 현탁액 | 의심스러운 단일 식민지 | 멸균 식염수 | 준비 |
| 4 | API 20E 스트립 접종 | 20 단일 스트립의 마이크로 튜브 | 37 ° C | 24 ± 2 H |
| 5 | 시약 추가 및 판독 | 보조 시약 | 수동 색상 해석 | 분 |
| 6 | API LAB 소프트웨어 분석 | 수치 프로파일 | 데이터베이스 매칭 | 즉각적인 |
세 가지 방법 모두 긍정적인 결과를 반환했습니다. 살 모 넬 라 블라인드 샘플 결과. 차이점은 달성된 분류학적 해결과 해당 결론에 도달하는 데 필요한 뒷받침 증거에 있습니다.. SN 0170-92 VIDAS는 유기체를 종 수준으로 식별했습니다., API 20E는 추가적으로 혈청형을 다음과 같이 해결했습니다. 살 모 넬 라 %ID가 다음과 같은 파라티피 A 99.5 그리고 T-값은 1.
| 방법 | 최종 식별 | 분류학적 수준 | 주요 증거 |
|---|---|---|---|
| SN 0170-92 | 살 모 넬 라 양 | 종 | TSI 반응, 음성 라이신/우레아제/V-P/KCN/인돌/말로네이트/둘시톨, "O" 항혈청 양성 |
| 라이브 | 살 모 넬 라 양 | 종 (화면) | 단일클론 항체에 대한 자동화된 ELFA 신호 |
| API 20E | 살 모 넬 라 파라티피 A | 혈청형 | 20-반응 생화학적 프로필; %ID 99.5; t = 1 |
| 의견 일치 | 3개 모두 긍정적 | 확인된 종 | API 20E는 최고의 해상도를 제공합니다. |
샘플을 20 API 20E 스트립의 마이크로 튜브. 아래 표는 관찰된 양성 반응을 기록합니다. (+) 또는 부정적인 (-) 모든 테스트에 대한 반응. 이 프로필은 API LAB 소프트웨어가 식별 정보를 계산한 원시 데이터입니다..
| ONPG | ADH | LDC | ODC | CIT | H2S | URE | TDA | IND | 부사장 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| - | - | - | + | - | - | - | - | - | - |
| 젤라틴 | 글루 | 남성 | 이노 | 소르 | RHA | 낭 | 멜 | 에이미 | 우리는 구매한다 | 황소 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| - | + | + | - | + | + | - | + | - | + | - |
소프트웨어 출력: API LAB은 프로필을 다음과 같이 식별했습니다. 살 모 넬 라 파라티피 A, %ID = 99.5 T-값 = 1, 우수한 신분증으로 평가됨.
SN 0170-92 및 VIDAS는 모두 살 모 넬 라 종 수준에서 긍정적인 결과. API 20E가 반환됨 살 모 넬 라 파라티피 A, 유기체를 혈청형으로 식별. 다음 표는 해상도를 비교합니다., 증거 사슬, 및 각 방법의 확인부담.
| 표준 | SN 0170-92 | 라이브 | API 20E |
|---|---|---|---|
| 최종 통화 | 살 모 넬 라 양 | 살 모 넬 라 양 | 살 모 넬 라 파라티피 A |
| 분류학적 깊이 | 종 | 종 (상영) | 혈청형 |
| 식별 신뢰도 | 높은 (참조 방법) | 화면에 비해 높음 | %ID 99.5; t = 1 |
| 생화학적 증거 | 여러 개의 개별 튜브 | 없음 (면역학적) | 20 통합된 반응 |
| 혈청학적 증거 | 예 ("O"항혈청) | 아니요 | 아니요 (소프트웨어 추론) |
| 확인부담 | 독립형 | 양성이면 일반적인 확인이 필요합니다. | 독립형 |
| 규제적 지위 | 분쟁에 대한 참고방법 | FDA가 인정한 스크리닝 | 소형화된 기존 |
총 경과 시간은 감지 방법을 선택할 때 결정적인 작동 매개변수입니다.. SN 0170-92 대략적으로 필요합니다 100 H, 대략 API 20E 73 H, 그리고 VIDAS는 대략적으로 49 H 45 분. 공통 강화 단계를 수행할 때, 대충 소모하는 것 48 h 세 가지 방법 모두에서, 제외됩니다, 그 차이는 더욱 뚜렷해진다: SN 0170-92 대략 필요하다 73 H, API 20E에 대해 49 H, 그리고 VIDAS에 대해서만 1 H (또는 대략 19 h 농축 후 단계가 포함된 경우).
| 방법 | 총 경과 시간 | 농축을 제외한 시간 | 상대 속도 순위 |
|---|---|---|---|
| SN 0170-92 | 100시간 | ≒73시간 | 3 (가장 느린) |
| API 20E | ≒73시간 | ≒49시간 | 2 (중급) |
| 라이브 | ≒49시간 45 분 | 1시간 (농축 후 19시간) | 1 (가장 빠른) |
세 가지 방법은 초기 농축 순서를 공유하지만 이후에는 급격히 갈라집니다.. SN 0170-92 격리문화를 통해 진행됩니다., 선별검사, 생화학 테스트, 및 혈청학적 검사. API 20E는 격리배양을 통해 진행됩니다., API 20E 시약 스트립, 및 API LAB 소프트웨어 분석. VIDAS에는 농축만 필요합니다., 15분간 열처리, 및 악기 로딩.
| 공정단계 | SN 0170-92 | API 20E | 라이브 |
|---|---|---|---|
| 농축 문화 | ✓ | ✓ | ✓ |
| 격리 문화 | ✓ | ✓ | - |
| 선별검사 | ✓ | - | - |
| 생화학 테스트 | ✓ (개별 튜브) | ✓ (20-잘 벗기다) | - |
| 혈청학적 검사 | ✓ | - | - |
| 악기 판독 | - | - | ✓ (미니 라이브) |
| 소프트웨어 분석 | - | ✓ (API 연구실) | ✓ (온보드) |
SN 0170-92 방법은 배양 배지에서 유기체의 표현형 발현과 항원-항체 응집에 따라 달라집니다.. API 20E는 표현형에 따라 달라집니다., 그러나 생화학적 반응을 소형화하고 해석을 데이터베이스에 위임합니다.. VIDAS는 효소 결합 형광 분석법을 사용합니다. (열하나) 매우 특이적인 단일클론 항체에 결합된 형광 화합물이 다음과 반응하는 방식입니다. 살 모 넬 라 항원; 생성된 형광 물질은 기기에 의해 감지됩니다., 신속한 검진 가능.
| 방법 | 탐지 원리 | 분자표적 | 판독 모드 |
|---|---|---|---|
| SN 0170-92 | 전통문화, 생화학적 반응, 혈청응집 | 대사 효소 및 O 항원 | 시각적 색상 / 교착 |
| API 20E | 하나의 스트립에서 소형화된 생화학 반응 | 20 효소 / 발효 경로 | 시각적 색상 변경 및 소프트웨어 데이터베이스 |
| 라이브 | 효소 결합 형광 분석 (열하나) | 살 모 넬 라 항원 | 기기 형광 신호 |
| 자동화 수준 | 수동 | 수동 접종, 자동 통역 | 완전 자동화된 분석 |
| 규제 인식 | 국제적으로 인정되는 참조 방법 | 널리 사용되는 기존 방식 | FDA가 인정한 신속 선별검사 |
세 가지 방법 각각은 속도 간의 균형 곡선에서 뚜렷한 위치를 차지합니다., 비용, 해결, 규제 수용. 다음 표에는 이 비교 연구에서 관찰된 장점과 한계가 통합되어 있습니다..
| 방법 | 장점 | 단점 |
|---|---|---|
| SN 0170-92 |
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| API 20E |
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| 라이브 |
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모든 실험실 환경에 최적인 단일 방법은 없습니다.. 아래 선택 매트릭스는 세 가지 방법을 일반적인 운영 시나리오에 매핑합니다., 실험실이 처리량에 따라 가장 적절한 경로를 선택할 수 있도록, 예산, 규제 환경.
| 대본 | 권장 방법 | 이론적 해석 |
|---|---|---|
| 높은 처리량 스크리닝 | 라이브 | 최단 소요 시간, 자동 판독 |
| 혈청형 수준 식별 필요 | API 20E | %ID로 직접 입력 99.5 |
| 규제 분쟁 또는 확인 테스트 | SN 0170-92 | 국제적으로 인정받는 참조 방법 |
| 제한된 장비 예산 | SN 0170-92 | 값비싼 장비가 필요하지 않습니다. |
| VIDAS 화면의 신속한 양성 확인 | API 20E 또는 SN 0170-92 | 추정 결과의 기존 확인 |
| 균형 잡힌 속도와 해상도 | API 20E | 분류학적 깊이가 높은 중간 시간 |
아래 표는 연구에서 보고된 모든 정량적 매개변수를 단일 조회 참조로 통합합니다.. 이는 실험실 표준 운영 절차 및 방법 검증 서류에 직접 삽입하기 위한 것입니다..
| 매개 변수 | SN 0170-92 | API 20E | 라이브 |
|---|---|---|---|
| 샘플 크기 | 25 g | 25 g | 25 g |
| 사전 농축 볼륨 | 225 mL 혈압 | 225 mL 혈압 | 225 mL 혈압 |
| 선택적 농축 | 10 밀리리터로 100 밀리리터 TTB | 10 밀리리터로 100 밀리리터 TTB | 10 밀리리터로 100 밀리리터 TTB |
| 농축 후 | - | - | 1 밀리리터로 10 mL M 국물 |
| 열처리 | - | - | 100 ° C, 15 분 |
| 격리 매체 | 비스무스 아황산염; DCLS | 비스무스 아황산염; DCLS | 없음 |
| 생화학 플랫폼 | 개별 튜브 | API 20E 스트립 | 없음 |
| 혈청학 | "O"항혈청 | 필요하지 않음 | 필요하지 않음 |
| 기구 | 없음 | API 랩 소프트웨어 | 미니 라이브 |
| 총 시간 | 100시간 | ≒73시간 | ≒49시간 45 분 |
| 식별 수준 | 종 | 혈청형 | 종 (화면) |
현재 중국 수출입 검사 및 검역 산업 표준 살 모 넬 라 (SN 0170-92) 식별하고 확인하기 위해 생화학 반응과 혈청학적 반응에 의존합니다. 살 모 넬 라. 탐지주기가 길다, 복잡한 생화학적 테스트 절차, 많은 수의 시약이 필요합니다.. API 20E는 본질적으로 전통적인 방법을 계속하지만 생화학 테스트의 소형화 및 통합을 달성합니다.: 20 생화학 반응은 단일 스트립에 집중되어 있습니다., 모든 생화학 테스트가 한 번의 작업으로 완료됩니다.. VIDAS는 현대적인 효소 결합 면역형광 기술을 채택합니다. (열하나). 항체와 결합된 형광 화합물을 사용합니다.; 매우 특이적인 형광 표지 단일클론 항체가 다음과 반응할 때 살 모 넬 라 항원, 생성된 형광 물질은 기기로 감지될 수 있습니다., 이를 통해 신속한 검사가 가능합니다. 살 모 넬 라. VIDAS 방식은 미국 FDA 승인을 받았습니다..
| 합성 차원 | 세 가지 방법의 위치 |
|---|---|
| 운영 단순성 | 단순한 삶 > API 20E 중급 > SN 0170-92 가장 복잡한 |
| 시간 소모 | 최단 수명 > API 20E 중급 > SN 0170-92 가장 긴 |
| 능률 | LIVES 최고 > API 20E 중급 > SN 0170-92 가장 낮은 |
| 분류학적 해결 | API 20E 최고 (혈청형) > SN 0170-92 (종) > 라이브 (화면) |
| 장비 및 소모품 비용 | LIVES 최고 > API 20E 중급 > SN 0170-92 가장 낮은 |
| 위양성 위험 | VIDAS는 기존 확인이 필요합니다.; SN과 API는 독립적입니다. |
| 규제 역할 | SN 0170-92 분쟁의 참고방법입니다; VIDAS는 FDA가 인정한 스크리닝입니다.; API 20E는 소형화된 기존 식별 방법입니다. |
| 연구 식별 | CNCA-06-02 숙련도 테스트, 치킨밀, 일반적인 병원성 박테리아 |
| 비교 방법 | 라이브, API 20E, SN 0170-92 |
| 샘플 결과 | 하나의 긍정적인 살 모 넬 라 격리하다, 다음과 같이 입력 s. 파라티피 A |
| SN 0170-92 시간 | 총 100시간; 농축을 제외하고 약 73시간 |
| API 20E 시간 | 총 73시간; 농축을 제외하고 약 49시간 |
| LIVES팀 | ≒49시간 45 내 총액; 농축을 제외하고 1시간 (농축 후 19시간) |
| API 20E 식별 | %아이디 = 99.5, T-값 = 1, 탁월한 식별 |
| 주요 VIDAS 제한사항 | 보고된 오탐지; 긍정적인 결과에는 전통적인 확인이 필요합니다. |
| 키 SN 0170-92 힘 | 국제적으로 인정되는 참조 방법; 분쟁 해결의 기초 |
| 주요 API 20E 강점 | 통합된 20개 반응 생화학 스트립; 혈청형에 대한 직접적인 식별 |
이 비교 연구의 결과는 단일 방법을 독점적으로 채택하기보다는 계층화된 실험실 전략을 뒷받침합니다.. 권장되는 운영 모델은 신속한 심사와 확증적 참조 테스트 및 타겟 타이핑을 결합합니다..
| 우선 사항 | 추천 | 정당화 |
|---|---|---|
| 높은 | VIDAS를 대용량 샘플의 기본 스크리닝 도구로 사용 | 최단 소요 시간, 가장 간단한 작업 흐름, FDA 인정 |
| 높은 | SN의 모든 VIDAS 양성 결과 확인 0170-92 또는 API 20E | AOAC에서 오탐지를 보고함; 기존 확인이 필요합니다 |
| 중간 | 혈청형 수준 식별이 필요한 경우 API 20E를 사용하세요. | %ID로 직접 입력 99.5 및 T-값 1 |
| 중간 | SN 유지 0170-92 분쟁 해결 참조 방법으로 | 국제적으로 인정되는 기준선 살 모 넬 라 식별 |
| 낮은 | 실험실 품질 매뉴얼에 방법 선택 근거를 문서화합니다. | 인증 감사 및 고객 투명성 지원 |
| 낮은 | 일상적인 품질 지표로 VIDAS 위양성 비율을 추적합니다. | 스크리닝 단계의 지속적인 성과 모니터링 가능 |
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